一、名词解释

1 capacity fact：容量因子，也称分配容量或容量比，用k′表示。其定义为：一定温度与压力

下两相达平衡后，溶质在固定相和流动相中分配量（质量或摩尔数）之比.

2 分配系数：K,一定温度与压力下两相达平衡后，组分在固定相和流动相中浓度的比值;

3 extra-column effect：柱外效应，即除柱内多种因素产生的色谱峰扩张外，其它产生峰扩张的

因素之和：进样系统，系统连接管，检测器及其它柱外因素引起的峰扩张。

4 gradient elution：梯度洗脱，在HPLC分析中，控制流动相组成或洗脱强度随时间的改变而

改变，以使极性差异较大的多个组分均能分离,同时谱峰间隔较均匀，分析时间尽量短。

5 HPSEC：高效体积排阻色谱法,即以多孔性填料为固定相，依据样品组分分子体积大小的差

别进行分离的液相色谱方法。常用于肽和蛋白质的分子量分布测定及多步分离纯化程序中。其

填料一般有硅胶基质和合成高聚物基质以及高交联多糖型凝胶三种。

6 ODS：十八烷基键合硅胶，又称C18. 典型的反相色谱柱，表面键和的基团为非极性羟基，

适于分离弱极性，中等极性，较强极性及可电离的酸碱性有机物。

7 基线：在正常操作条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的连续的响应信号，一般

是一条直线;

8 峰面积：色谱曲线与基线间所包围的面积;

9 半峰宽：亦称半宽度,半峰宽度,指色谱峰高一半处的宽度

10 标准偏差σ：正态分布曲线x=±1时（拐点）的峰宽之半。正常峰宽的拐点在峰高的0.607

倍处。标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。σ小，分散程度小、峰形瘦、

柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。

11 死时间t0:流动相流过色谱柱所需时间(不保留组分流过色谱柱所需时间)

12 调整保留时间:tR’=tR-t0，指扣除死时间后的保留时间。

13 保留时间tR—进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。

14 相对保留值:(用γ或α表示,也称分离因子)两个组分调整保留值之比=tR2’/tR1’=VR2’/

VR2’;

15 分离度: 相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值，也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程

度。

16 色谱柱效：每米柱长具有的理论塔板数定义为色谱柱效，它是衡量色谱柱分离效能高低的

一种量度。

1.在进行HPLC分析时，为防止分析柱污染，应采取哪些措施？

1）．加一个保护柱（预柱），其固定相性质应与分离柱一样或相近。

2）．样品要尽量净化，如沉淀蛋白，去除色素和无机盐等。

3). 样品分析结束后,应及时用适当溶剂清洗色谱柱.

2.乙醇的沸点为78.3℃，丁酮的沸点为79.6℃，在气相色谱柱上是否一定是乙醇先出峰，丁酮后

出峰，为什么？

不一定.因为保留值除与样品组分的沸点有关外，还与样品及固定相的极性有关。乙醇（bp 78℃）

和丁酮（bp 80℃）二个组分在非极性柱上，因为组分出峰的顺序由蒸汽压决定，沸点高的保留

时间长，所以乙醇先出峰，丁酮后出峰；在极性柱上，沸点和分子之间作用力同时作用，在强

极性柱上分子间的作用力其主要作用，按极性大小出峰，乙醇的极性比丁酮大，所以丁酮先出

峰，乙醇后出峰。

4.电喷雾离子化的原理是什么?离子化过程分哪三步？

原理：在喷针针头与施加电压的电极之间形成强电场，该电场使液滴带电，带电的溶液在电场

的作用下向带相反电荷的电极运动，并形成带电的液滴。由于小液滴的分散比表面积增大，在

电场中迅速蒸发，结果是带点液滴表面单位面积的场强极高，从而产生液滴的“爆裂”。重复此